中医学理论认为，气升降出入运行于全身，是人体生命活动的根本。当人体某一脏腑或经络发生病变，则影响气的疏通，出现气滞或气逆。气滞的临床表现特点为胀、闷、痛，而气逆则表现为呕吐、恶心或喘息。随气机阻滞部位不同，可表现为不同的临床症状，如脾胃气滞可致脘腹胀满疼痛、嗳气泛酸、恶心呕吐、便秘或腹泻，肝郁气滞可致情志异常。正常的情志活动不仅属于心主神明的生理学范畴，还与人体气血的正常运行有着密切的关系，特别是肝气的疏泄是调理情志的主要机制。肝的疏泄功能正常，则气血调达，情志调和；否则，就会出现肝气郁滞，情志忧郁，神疲倦怠，失眠，纳差等与消化不良和抑郁症相关的临床表现，即痞满证郁证中医证候。从现代医学的角度来看，气滞或气逆与消化系统疾病如消化不良和抑郁症有关，其病因主要是内脏平滑肌的运动功能紊乱，或表现为亢进如呕吐、疼痛、腹泻等，或表现为抑制如胀气、便秘等。因此，疏肝解郁、和胃降逆、通利消滞可以在缓解功能性消化不良症状的同时，改善神经精神活动，特别是可以改善互为因果关系的功能性消化不良伴抑郁症患者的神经精神症状，即改善痞满证郁证中医证候。

达立通颗粒是由柴胡、枳实、木香、陈皮、清半夏、蒲公英、焦山楂、焦槟榔、鸡矢藤、党参、延胡索、六神曲（炒）十二味中药材经蒸馏法提取挥发油、倍他环糊精包合挥油、水提法提取活性成分、醇沉法除杂后得到的水溶性稠膏与糊精、甜菊素制成的无蔗糖型颗粒剂，具有清热解郁、和胃降逆、通利消滞作用，用于肝胃郁热所致痞满证。症见胃脘胀满、嗳气、纳差、胃中灼热、嘈杂泛酸、脘腹疼痛、口干口苦；运动障碍型功能性消化不良见上述症状者。

为了探索达立通颗粒治疗功能性消化不良伴抑郁症的作用机制、药效物质基础以及药效化学标志物和生物标志物，南昌弘益药业有限公司于2021年5月与王广基院士团队合作开展相关研究，已经取得了一系列研究成果，并以学术论文和研究进展报告的形式陆续发表。前期研究结果显示，达立通颗粒能显著促进胃肠运动和胃排空，其治疗功能性消化不良的主要药效活性成分是黄酮类、生物碱类、有机酸类、萜类化合物；口服达立通颗粒，其主要药效活性成分能被机体快速吸收，在组织器官中广泛分布，其中，绝大部分药效活性成分在胃和肠靶器官分布，有少量药效活性成分在脑组织中分布；达立通颗粒能调节肠道免疫系统，具有抗炎、抗氧化作用，能修复功能性消化不良模型动物受损的十二指肠绒毛，对功能性消化不良模型动物胃、肠神经递质释放具有调节作用，能显著改善慢性社交挫败应激抑郁模型动物的抑郁症状。下一阶段，王广基院士团队将进一步深入探索达立通颗粒治疗功能性消化不良伴抑郁症（抑郁症伴功能性消化不良）的作用机制，开展肠道结构和功能、肠道菌群、肠道宏基因研究以及郁证研究，包括达立通颗粒对功能性消化不良模型动物十二指肠屏障的修复作用、肠道菌群对达立通颗粒体内代谢的影响、达立通颗粒对功能性消化不良模型动物肠道菌群及内源性小分子和神经递质的影响、功能性消化不良模型动物肠道菌群宏基因组学特征、达立通颗粒对糖水偏好相关的抑郁模型动物的药效学及其作用机制研究等。为建立以药效化学标志物和药效生物标志物为核心的达立通颗粒整体质量控制和评价体系以及达立通颗粒治疗功能性消化不良伴抑郁症临床试验方案设计提供科学依据。

快感缺失、兴趣缺失、情绪低落是抑郁症的核心症状。 啮齿类动物对甜食具有天生的偏好，这种偏好与其体内分泌的多巴胺等兴奋性神经递质及5-羟色胺等抑制性神经递质和愉悦的精神情志密切相关。通过对啮齿类动物糖水偏好的天性和精神情志进行干扰，可导致其体内多巴胺等兴奋性神经递质分泌明显减少、5-羟色胺等抑制性神经递质分泌明显增多等异常，表现为精神情志低落、萎糜不振等抑郁症状和胃脘胀满、食欲不振、早饱、胃中灼热、泛酸嘈杂、脘腹疼痛等功能性消化不良症状。通过糖水偏好实验，检测给药模型动物糖水偏好恢复情况和神经递质释放回调等情况以及抑郁症和功能性消化不良症状改善情况，评价达立通颗粒治疗功能性消化不良伴抑郁症的疗效和作用机制。因此，糖水偏好实验是研究达立通颗粒治疗功能性消化不良伴抑郁症药效学和作用机制的理想方法。本文专门介绍糖水偏好实验的原理、实验方法、评价指标等，以期对达立通颗粒治疗功能性消化不良伴抑郁症的药效学和作用机制有一个比较全面的理解。

一、糖水偏好实验原理

快感缺失、兴趣缺失、情绪低落是抑郁症的核心症状。糖水偏好实验（Sucrose Preference Test，SPT）的原理是基于啮齿类动物对甜食的天生偏好。在实验中，动物被提供两个饮水装置，一个装有蔗糖溶液，另一个装有饮用水，动物可以自由选择。正常情况下，健康且心理状态良好的动物会表现出对甜味（如蔗糖溶液）的显著偏好。这种偏好反映了动物的奖励系统功能，主要是脑中的多巴胺途径。多巴胺是一种与愉悦感、奖励和动机密切相关的兴奋性神经递质。当动物处于抑郁状态时，它们的奖励系统可能受损，表现为对甜味的偏好降低。因此，通过比较动物对糖水与饮用水的选择，可以间接评估它们的情绪状态和抑郁程度。研究显示，1%～2%的蔗糖溶液浓度是区分小鼠或大鼠是否有快感缺失和抑郁的理想选择。

糖水偏好实验是一种广泛用于评估啮齿类实验动物情绪状况的行为测试。它主要用于检测动物的快乐水平和抑郁症状。这种测试基于一个观察到的现象：健康的动物通常更喜欢甜味的食物和饮料，而忧郁或抑郁的动物可能对甜味物质的喜好程度降低。通过检测动物对蔗糖溶液的偏好程度，可以作为评估动物快感缺失症状和抑郁程度和检测抗抑郁药物改善行为学的有效方法，通过观察药物治疗后动物糖水偏好是否恢复，来评估抗抑郁药物的疗效。

二、糖水偏好实验简介

糖水偏好实验是检测抑郁症中快感缺失症状的经典实验，1982年由模型建立者Willner首次采用，目前，该实验是抗抑郁药物药效学研究最主要的行为学检测方法之一。

糖水偏好实验是利用啮齿类动物对甜味的偏好而设计一种检测方法。动物禁食一段时间后，同时给予饮用水和低浓度蔗糖水，以动物对蔗糖水的偏嗜度（蔗糖偏嗜度）为指标检测动物是否出现快感缺失这一抑郁症状。

正常情况下，动物倾向于选择甜味的蔗糖溶液。但在慢性应激导致的抑郁模型中，动物对蔗糖溶液的偏好会减少。通过检测动物对蔗糖溶液的偏好程度，可以作为评估动物快感缺失症状和抑郁程度的有效方法。研究显示，1%～2%的蔗糖溶液浓度是区分小鼠或大鼠是否有快感缺失和抑郁的理想选择。

三、糖水偏好实验设备

糖水偏好实验设备主要有饲养笼、不锈钢栅栏底板、饮水瓶、接触探测电路、控制器、糖水偏好实验软件等。

糖水偏好实验设备是基于电流检测的原理，通过检测动物舔饮水瓶头金属嘴和动物站的金属板之间形成电流回路（检测电流小于2μA）来计算动物的舔水次数，从而评价动物的糖水偏好。

四、糖水偏好实验流程

糖水偏好实验包括动物适应期、动物基线检测、测试和数据分析四个阶段，完成一套实验的时间约8天。

（一）适应期

1、适应阶段（第1天至第4天）

在这一阶段，将装有1%蔗糖溶液和饮用水的两个饮水瓶分别放置在动物饲养笼或实验测试箱的对应位置。为避免动物形成位置偏好，应每天更换瓶子的位置。

2、蔗糖溶液适应

从第1天的下午5点开始，连续48小时在动物饲养笼中放置两个饮水瓶，一个装有1%蔗糖溶液，另一个装有饮用水，直至第3天的下午5点。

3、实验设备准备

在第3天，使用75%乙醇或无味消毒水清洁动物饲养笼或实验测试箱，并晾干。在每个笼或箱体的两个饮水瓶中分别灌装新鲜的1%蔗糖溶液和饮用水，并在食槽中放置适量食物。每天更换两个瓶子的位置，以避免动物形成位置偏好。

4、实验设备适应

在第3天的下午5点，将适应好蔗糖溶液的动物从饲养笼转移到准备好的实验测试箱中。此时，动物可以自由接触两种不同的溶液（1%蔗糖溶液和饮用水）及食物。这一步骤持续一天，至第4天的下午5点，之后将动物放回原饲养笼，提供饮用水和食物。

（二）基线检测测

1、实验测试箱准备

提前准备好实验测试箱，分别在两个饮水瓶中灌装新鲜的1%蔗糖溶液和饮用水，并在食槽中放置适量食物。

2、第一次测试

在第4天晚上9:00，将实验动物从饲养笼转移到实验测试箱中，记录从当晚9:00到第5天早上9:00，共12小时内动物对装有两种溶液的饮水瓶头金属嘴的舔舐次数。测试结束后，将动物放回饲养笼，并提供饮用水和食物，观察记录动物的外观、行为、精神状态、饮食、饮水、分泌物、排泄物、体重等情况。

3、清洁测试实验箱

清洁实验测试箱体，以备后续使用。

4、第二次测试

在第5天晚上9:00，再次将实验动物从饲养笼转移到实验测试箱中（注意更换两个饮水瓶放置的位置以避免位置偏好），并记录从当晚9:00到第6天早上9:00，共12小时内动物对装有两种溶液的饮水瓶头金属嘴的舔舐次数。测试结束后，将动物放回饲养笼，并提供饮用水和食物，观察记录动物的外观、行为、精神状态、饮食、饮水、分泌物、排泄物、体重等情况。

5、剖检

取部分动物剖检，检测其十二指肠结构和功能以及神经递质水平。

6、数据记录

记录两轮基线测试的数据、十二指肠结构和功能以及神经递质水平，用于后续的对比和分析。

（三）测试

1、饥饿处理

测试前一天，即第6天晚上9点至第7天晚上9点，从动物饲养笼中移除所有食物和水瓶，进行饥饿处理。

2、实验测试箱准备

提前准备好实验测试箱，分别在两个饮水瓶中灌装新鲜的1%蔗糖溶液和饮用水，并在食槽中放置适量食物。

3、测试

在第7天晚上9:00，将实验动物放入实验测试箱中，记录至第8天早上9:00，共12小时内动物对装有两种溶液的饮水瓶头金属嘴的舔舐次数，观察记录动物的外观、行为、精神状态、饮食、饮水、分泌物、排泄物、体重等情况，并对动物进行剖检，检查十二指肠结构和功能以及神经递质水平。

（四）数据分析

1、快感缺失定义

在糖水偏好测试中，动物对蔗糖偏好的降低被视为快感缺失。使用测试箱体测量的是动物对两种溶液的舔舐次数，由于舔舐次数与溶液摄入量成正相关，因此可以通过比较舔舐次数来评估蔗糖偏好。

2、蔗糖偏好评估

如果蔗糖溶液的舔舐次数多于饮用水，表示有蔗糖偏好；如果蔗糖溶液的舔舐次数减少，表示蔗糖偏好降低，可能是快感缺失的迹象，这是抑郁状态的一个指标。

3、糖偏好替代测量方法

在没有舔舐次数计数装置的情况下，可以通过测量饮水瓶内溶液的体积或质量来计算蔗糖偏好比。蔗糖偏好比＝（蔗糖摄入量/总摄入量）×100%，其中总摄入量是蔗糖溶液和饮用水摄入量的总和。

4、外观行为观察

动物的外观、行为、精神状态、饮食、饮水、分泌物、排泄物、体重等变化，可以用于判断抑郁症、功能性消化不良症状改善情况。

5、十二指肠结构和功能检查

动物的十二指肠结构和功能变化，可以用于分析药物的作用机制。

6、神经递质水平检测

动物的神经递质释放水平变化，可以用于分析药物的作用机制。

四、糖水偏好实验注意事项

昼夜节律会影响实验动物的饮水行为，因此在糖水偏好实验中选择固定的糖水偏好测试时间非常重要。为确保一致性，所有基线测试和最终测试均应在夜间进行。

为减少其他变量对实验结果的影响，应使用蔗糖偏好比而不是绝对摄入量来作为糖水偏好评估的主要指示参数。

为避免饮水瓶泄漏等可能的实验误差，应使用特制的舔舐行为测试箱。由于实验动物每次的饮水量较小，可能难以在特定测试时间内观察到绝对摄入量的显著差异，此时统计舔舐次数可能会提供更明显的数据差异。

为防止实验动物饮水量异常，必须严格控制蔗糖溶液的浓度和测试时长等关键因素，确保实验条件的一致性和准确性。

 

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