由国家药品监督管理局主管、国家药品监督管理局信息中心主办的《中国药物评价》杂志2018年6月第35卷第3期发表了“达立通颗粒治疗功能性消化不良作用机理研究”论文，该研究利用药理学手段探索了达立通颗粒治疗功能性消化不良的疗效及机制，进行了达立通颗粒对小鼠小肠推进运动的作用、对豚鼠离体回肠平滑肌及大鼠离体胃底平滑肌条的影响、对大鼠胃电活动的作用、对功能性消化不良大鼠的作用研究。针对功能性消化不良的病理病机和临床症状，通过胃排空及小肠推进运动、胃肠电活动、胃动素水平检测等实验，探讨了达立通颗粒促胃肠动力治疗功能性消化不良的作用机理。研究表明，达立通颗粒促进胃肠电活动和胃肠运动的作用机理与其能刺激迷走神经乙酰胆碱通路、拮抗Ca²⁺的作用有关，而与组胺H1和H2受体无关，其效应与莫沙必利相当；达立通颗粒对阿托品抑制平滑肌的作用有明显的对抗作用；达立通颗粒通过增加小肠推进、提高血清和组织胃动素分泌促进胃肠动力而发挥治疗功能性消化不良的作用；达立通颗粒能显著增加大鼠的胃电慢波频率，对大鼠胃电活动的影响与莫沙必利相似。提示达立通颗粒是通过增加胃动素分泌和促进胃电活动促进胃排空和胃肠运动，从而达到治疗功能性消化不良的目的。（总经办   供稿   2018-8-21）

 

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达立通颗粒治疗功能性消化不良作用机理研究

郭晟¹，张俊明¹，郑国安¹, 张晓丽², 陶琳², 赵银鹰²

（1. 江西省药物研究所, 江西 南昌330029；2. 南昌弘益药业有限公司，江西 南昌330069）

【摘要】目的：利用药理学手段研究达立通颗粒治疗功能性消化不良的疗效及机制。方法：进行了达立通颗粒对小鼠小肠推进运动的作用、对豚鼠离体回肠平滑肌及大鼠离体胃底平滑肌条的影响、对大鼠胃电活动的作用、对功能性消化不良大鼠的作用研究。结果：达立通颗粒能促进肠运动、对硫酸阿托品抑制平滑肌的作用有明显的对抗作用、同时能增加胃动素释放和胃电活动等。结论：达立通颗粒具有治疗功能性消化不良的作用。

【关键词】达立通颗粒 ；功能性消化不良;机理研究

【中图分类号】R      【文献标识码】A        【文章编号】2095-3593-2018-

 Study on the Mechanism of Dalitong Granule in the Treatment of Functional Dyspepsia

GUO Sheng¹,ZHANG Jun-ming¹,ZHENG Guo-an¹，ZHANG Xiao-li²,TAO Lin²,ZHAO Yin-ying²

(1. Jing Xi Institute of Materia Mdeica，Jiangxi Nanchang，330029，Chin；

2.Nanchang Hongyi Pharmaceutical Co.，Ltd,Jiangxi Nanchang，330069,China )

[Abstract] Objective：To study the pharmacological means through Dalitong granule effect and mechanism of the treatment of functional dyspepsia particles. Methods：The action of Dalitong granule movement of small intestine propulsion in mice, intestinal propulsion effect on isolated guinea pig ileum smooth muscle and the effect of isolated rat gastric muscle strips of rats，gastric electrical activity of functional dyspepsia rats research. Results：Dalitong granule can promote the intestinal movement，inhibition of smooth muscle function has obvious antagonistic effec，also can increase the release of motilin and gastric electrical activity etc. Conclusion：Dalitong granule has the function of the treatment of functional dyspepsia.

[Key words]Dalitong granules；Functional dyspepsia；Mechanism

 

达立通颗粒由十二味中药组成：方中柴胡、枳实为君药，木香、清半夏、陈皮共为臣药，蒲公英、六神曲（炒）、焦槟榔、焦山楂、鸡矢藤、党参、延胡索为佐药。其功

能主要为：清热解郁，和胃降逆，通利消滞。用于肝胃郁热所致痞满证，症见胃脘胀满、嗳气、纳差、胃中灼热、嘈杂泛酸、脘腹疼痛、口干口苦；运动障碍型功能性消化不良见上述症状者。本文通过胃排空及小肠推进运动、胃肠电活动、胃动素等药理学研究实验，探讨达立通颗粒促胃肠动力治疗功能性消化不良的作用机理，为临床应用提供实验数据。

   1 实验材料

   1.1 供试品

达立通颗粒，南昌弘益药业有限公司生产，批号：130927，含量：6g/袋（每袋10.5g生药，实验剂量以生药量计算），用法用量：温开水冲服，一次1袋，一日3次。

1.2 阳性对照品

枸橼酸莫沙必利片（江苏豪森药业有限公司生产，批号：130502），用法用量：一次1片，一日3次。

1.3 造模用药

硫酸阿托品注射液（河南润弘制药有限公司生产，批号：1307221，141221），规格：1mL:0.5mg。

1.4 试剂

戊巴比妥钠（广州比西杰贸易有限公司出品，批号：WS20120112），规格：25g/瓶。

1.5 仪器

Medlab记录仪，南京美易科技有限公司；5g肌张力换能器，北京新航兴业科贸有限公司；Stat Fax2100酶标仪，北京普朗新技术有限公司。

1.6 实验动物

KM种小鼠，SPF级，120只，18～22g，雄性，合格证号：No.43004700003540，动物生产许可证号：SCXK（湘）2011-0003，来源：湖南斯莱克景达实验动物有限公司。

豚鼠，80只，200~250g，动物合格证号：2007001103292，动物生产许可证号SCXK(沪)：SCXK（沪）2012-0011，来源：上海市松江区松联实验动物。

SD大鼠，SPF级，70只，200～250g，雄性，动物合格证号：No.43004700023346，动物生产许可证号：SCXK（湘）2013-0004，来源：湖南斯莱克景达实验动物有限公司。

SD大鼠，SPF级，50只，200～220g，雌雄各半，动物合格证号：No.43004700026424，动物生产许可证号：SCXK（湘）2013-0004，来源：湖南斯莱克景达实验动物有限公司。

SD大鼠，SPF级，120只，180～200g，雄性，动物合格证号：NO.43004700005329，动物生产许可证号：SCXK（湘）2013-0004，来源：湖南斯莱克景达实验动物有限公司。

2  实验方法与结果

2.1 对硫酸阿托品模型小鼠小肠推进的影响^[1,2]

2.1.1 实验餐配制  10g羧甲基纤维素钠溶于250mL水中，分别加入16g奶粉、8g蔗糖、8g淀粉和2g活性碳，搅拌均匀，配制成300mL黑色半固体糊状物。

2.1.2 实验方法  KM种小鼠60只，按体重分层随机分为达立通颗粒2.6、5.2及10.5g·kg^-1剂量组，枸橼酸莫沙必利2.5mg·kg^-1剂量组，阴性对照组及模型组，每组10只，ig给药每天1次，连续给药7天，每只0.2mL，末次给药前禁食不禁水18h，末次给药后30min除对照组均腹腔注射硫酸阿托品0.1mL·10g^-1，15min各组均给予实验餐每只0.8mL，20min后处死动物，解剖，取小肠，平铺于玻璃板上，测量幽门至碳末前沿及幽门至回肠末端的长度，求其推进率。

2.1.3 检测指标  小肠推进率=（幽门至碳末前沿的长度-幽门至回肠末端的长度）/幽门至回肠末端的长度×100%。

2.1.4 统计学方法 所有数据以均数±标准差表示，采用DAS3.0统计软件，各组数据间的比较采用t检验。 

2.1.5 实验结果  达立通颗粒各剂量组，对硫酸阿托品模型小鼠小肠推进均具有对抗作用，其可增强模型小鼠小肠推进的作用，与模型组比较差异具有非常显著性意义（p<0.01）。

枸橼酸莫沙必利片2.5mg·kg^-1剂量组与模型组比较，差异具有显著性意义（P<0.05）。结果见表1。

2.2 对豚鼠离体回肠平滑肌的影响^[3,4]

2.2.1 实验方法  取豚鼠，禁食48h，击豚鼠的延髓部致其昏迷，迅速打开腹腔，取出回肠，立即置于通有空气的冷台氏液中，洗去内容物，将肠管剪成1.5～2cm长度段，放入盛有新鲜台氏液的培养明中，置4℃冰箱备用。

取肠管一段，将其一端固定于表本板的小钩上，另一端连接在肌力传感器上，置于20mL台氏液的恒温浴管（温度保持为37℃）中，同时通入空气60～80个气泡·min^-1，标本负荷0.05g，平衡30min，待试验系统及波动曲线稳定，记录曲线10min。按照拉丁方设计往浴槽中加入各剂量的药液。

2.2.2对正常离体肠平滑肌的影响  在恒温水浴槽中分别加入终浓度为2.6、5.2及10.5mg·mL^-1的达立通颗粒药液，观察给药前后肠管运动曲线的变化，以给药前5min和给药后10min的变化作为观测指标。每完成一次加药后，立即用新鲜台氏液冲洗2～3次，待肠管舒缩恢复正常后才可进行下一次给药，无法恢复正常舒缩的肠段弃去。

2.2.3对乙酰胆碱（Ach）所致痉挛状态下的离体肠平滑肌的影响  于恒温水浴槽中加入终浓度为1 mg·mL^-1的乙酰胆碱（Ach），约45s后，待乙酰胆碱作用趋势稳定后按照拉丁方设置往浴槽中加入各剂量的药液，观察给药前后肠管运动曲线的变化。

2.2.4对硫酸阿托品所致的松弛状态下离体肠平滑肌的影响  在恒温水浴槽中加入终浓度为5×10^-3mg·mL^-1的硫酸阿托品，约45s后，造成肠松弛后，按照拉丁方设置往浴槽中加入各剂量的药液，观察给药前后肠管运动曲线的变化。

2.2.5对苯海拉明所致的松弛状态下离体肠平滑肌的影响  在恒温水浴槽中加入终浓度为1×10^-1 mg·mL^-1的苯海拉明，约45s后，造成肠松弛后，按照拉丁方设置往浴槽中加入各剂量的药液，观察给药前后肠管运动曲线的变化。

2.2.6检测指标  给药前后回肠平滑肌运动幅度的峰峰值比值，每组选出10个记录曲线。

2.2.7统计方法  所有数据以均数±标准差表示，采用DAS3.0统计软件，各组数据间的比较采用t检验。

2.2.8实验结果  达立通颗粒各剂量组，对苯海拉明抑制平滑肌的作用无明显的影响，与模型组比较，差异无显著性意义（p>0.05），结果见表2。

达立通颗粒各剂量组，对硫酸阿托品抑制平滑肌的作用有明显的对抗作用，与模型对照组比较，差异具有显著性及非常显著性意义（p<0.05及p<0.01），结果见表3。

达立通颗粒各剂量组，对乙酰胆碱收缩平滑肌的作用无明显的影响，与对照组比较，差异无显著性意义（p>0.05），结果见表4。

2..3 对大鼠离体胃底平滑肌条的影响^[5,6]

2.3.1 营养液配制  台氏液（Tyrode）：NaCl 8.0 g、KCl 0.2 g、CaCl₂0.2 g、 NaHCO₃1.0 g、NaH₂PO₄0.065 g、MgSO₄•7H₂O0.26 g、Glucose 1.0 g，加蒸馏水至1000 mL，其中CaCl₂溶解后单独加入。每次实验时新鲜配制，通氧，4℃保存备用。

2.3.2模型制作  取禁食48h大鼠脱颈椎处死，开腹取出胃后立即浸入4℃通氧的台氏液中，沿胃小弯剪开胃腔，漂洗干净，剪出胃底部，交错剪成长1cm，宽3mm的胃底肌条。取2cm长的胃底肌条，上下两端用线结扎，下端挂在麦氏浴管底部的通气挂钩上，浴管中盛有10mL、（37±0.5）℃新鲜配制的台氏液，并持续供给95% O₂ 和5% CO₂ 混合气体（60～80个气泡·min^-1），另一端固定在肌肉张力换能器上，并将信号输入Medlab记录仪。加负荷1g，待胃底肌条收缩曲线稳定60min后开始实验。

2.3.3给药  等胃底肌条记录曲线平稳后记录10min，加入适量的工具药氯化钙、阿托品、乙酰胆碱、雷尼替丁及苯海拉明，60s后再加入相应的适量浓度的达立通颗粒药液低、中、高剂量药物，观察给药前后胃底肌条运动曲线的变化，以给药前1min和给药后5、10、20min的变化作为观测指标。每完成一次加药后，立即用新鲜台氏液冲洗2～3次，待胃底肌条舒缩恢复正常后才可进行下一次给药，无法恢复正常舒缩的胃底肌条弃去。各药物终浓度见表5。

 

 

 

2.3.4 检测指标  给药前后胃底平滑肌运动幅度，每组选出10个记录曲线。

2.3.5 统计学方法  所有数据以均数±标准差表示，采用DAS3.0统计软件，各组数据间的比较采用t检验。

2.3.6 实验结果

（1）对乙酰胆碱致胃底平滑肌条收缩的影响：达立通颗粒10.5、5.2mg·mL^-1浓度能抑制乙酰胆碱导致的胃底平滑肌条收缩作用，与模型组比较，差异有统计学意义（p<0.05），见表6。

（2）对氯化钙致胃底平滑肌条收缩的影响：达立通颗粒10.5、5.2、2.6 mg·mL^-1浓度能抑制氯化钙导致的胃底平滑肌条收缩作用，与模型组比较，差异有统计学意义（p<0.05或P<0.01），见表7。

（3）对阿托品致胃底平滑肌条舒张的影响：达立通颗粒10.5、5.2、mg·mL^-1浓度能抑制阿托品导致的胃底平滑肌条舒张作用，与模型组比较，差异有统计学意义（p<0.05），见表8。

（4）对苯海拉明致胃底平滑肌条舒张的影响：达立通颗粒各浓度不能抑制苯海拉明导致的胃底平滑肌条舒张作用，与模型组比较，差异无统计学意义（p>0.05），见表9。

（5）对雷尼替丁致胃底平滑肌条收缩的影响：达立通颗粒各浓度不能抑制雷尼替丁导致的胃底平滑肌条收缩作用，与模型组比较，差异无统计学意义（p>0.05）。见表10。

 

 

 

 

 

2.4对大鼠胃电活动的影响^[7,8]

2.4.1 实验方法  取SD大鼠，按体重随机分为达立通颗粒1.6、3.2及6.4g·kg^-1剂量组，枸橼酸莫沙必利1.5mg·kg^-1组，阴性对照组，每组10只，雌雄各半。各给药组按1mL·100g^-1灌胃给予大鼠相应剂量药液，空白组给予同体积蒸馏水，每日1次, 连续给药2周。

给药2周后，大鼠实验前禁食不禁水18h，用20%乌拉坦(1mL·100g^-1)腹腔注射麻醉， 剪腹毛，碘伏棉球消毒，剑突下正中切开腹壁，暴露胃，在胃窦部距幽门0.5cm处浆膜下埋置一对电极，固定好电极，关闭腹腔，电极线从切口引入到生理记录仪。稳定30min后开始记录，连续记录30min。慢波记录参数为时间常数：5s，频率：30Hz，放大倍数：5000。连续记录30min。

2.4.2 检测指标  计算每组动物稳定后10及30min时间段的慢波振幅、频率。

2.4.3 统计学方法  所有数据以均数±标准差表示，采用DAS3.0统计软件，各组数据间的比较采用t检验。

2.4.4 实验结果  达立通颗粒1.6、3.2及6.4g·kg^-1剂量组能增加大鼠的慢波频率，与阴性对照组比较，差异具显著性与非常显著性（p <0.05与p <0.01）。见表11。

 

2.5 对功能性消化不良大鼠的影响^[9-11]

2.5.1 实验餐配制  半固体糊：由羧甲基纤维素2.5g，奶粉4g，淀粉2g和活性炭1g加蒸馏水62.5mL 配成，比重1.1g·mL^-1。

2.5.2 实验方法  取SD大鼠60只，雄性，随机分为6组，分别为达立通提取液颗粒1.6、3.2及6.4g·kg^-1剂量组，枸橼酸莫沙必利1.5mg·kg^-1剂量组，阴性对照组及模型组，每组10只。

采用夹尾制造FD模型：将每组10只同笼大鼠，用长海绵钳夹大鼠尾巴远端1/3处，以不破皮为度，令其暴怒，寻衅与其他大鼠撕打，以激怒全笼大鼠。每次刺激30min，30min内连续不断地刺激，随着打斗的加剧，大鼠可能被抓伤，为避免炎症干扰，可用0.5％碘伏涂擦受伤部位，以控制感染，每隔3ｈ刺激1次，每日4次，连续刺激14ｄ。造模结束后3d按相应组别给予药物，连续给药7d，末次给药后禁食不禁水18h，给予实验餐3mL·kg^-1，40min后处死大鼠，处死前眼眶静脉采血3mL。迅速打开腹腔，结扎贲门和幽门，取下整胃，用滤纸拭干后称量胃全重。沿大弯侧切开胃，以蒸馏水冲洗胃内容物，滤纸拭干后称量胃净重。最后取胃窦壁（距幽门0.5cm的胃壁组织）全层约0.5cm×0.5cm。

2.5.3检测指标

（1）血清胃动素：取眼眶静脉血3mL，按试剂盒要求分离血清，在-4℃保存备用，ELLSA法测定血清胃动素。

（2）组织胃动素：取胃窦壁（距幽门0.5 cm的胃壁组织）全层约0.5cm×0.5cm，称量后匀浆，ELLSA法测定组织胃动素。

（3）胃排空率：［1-（胃全重-胃净重）／腹腔注射量］×100％。

（4）小肠推进度：取小肠量取小肠从幽门括约肌至肠内容物色素最前端及至盲肠的距离，两者之比即为胃肠碳末推进率。

2.5.4 统计学方法  所有数据以均数±标准差表示，采用DAS3.0统计软件，各组数据间的比较采用t检验。

2.5.5 实验结果

（1）大鼠胃排空率:达立通颗粒1.6、3.2g·kg^-1剂量组大鼠胃排空率明显较模型组增加，与模型组比较，差异均具有统计学意义（p<0.05与p<0.01）。

（2）大鼠小肠推进度：达立通颗粒1.6、3.2g·kg^-1剂量组大鼠小肠推进度明显较模型组增加，与模型组比较，差异均具有有统计学意义（p<0.05与p<0.01）。

（3）大鼠血清胃动素：达立通颗粒1.6、3.2、6.4g·kg^-1剂量均具有增加FD模型大鼠血清胃动素的作用，与模型组比较，差异具有统计学意义（p<0.05与p<0.01）。

（4）大鼠组织胃动素：达立通颗粒1.6、3.2、6.4g·kg^-1剂量均具有增加FD模型大鼠组织胃动素的作用，与模型组比较，差异具有统计学意义（p<0.05与p<0.01），见表12。

 3  讨论

功能性消化不良（FD）是指具有上腹痛、上腹胀、早饱、嗳气、食欲不振、恶心、呕吐等不适症状，经检查排除引起上述症状的器质性疾病的一组临床综合征，可单独或以一组症状出现，是临床最常见的一种功能性胃肠病。胃肠动力障碍被认为是FD的最主要病理生理学基础，包括胃内食物分布异常、胃排空延迟、小肠传输功能异常、胃容受性障碍、胃十二指肠运动协调失常、消化间期III相胃肠运动异常、胃肠电活动紊乱等被认为是导致FD的重要机制。

本研究通过胃排空及小肠推进运动、胃肠电活动、胃动素水平检测等实验，探讨达立通颗粒促胃肠动力治疗功能性消化不良的作用机理。

研究表明，达立通颗粒促进胃肠电活动和胃肠运动的作用机理与其能刺激迷走神经乙酰胆碱通路、拮抗Ca²⁺的作用有关，而与组胺H1和H2受体无关，其效应与莫沙必利相当；达立通颗粒对阿托品抑制平滑肌的作用有明显的对抗作用；达立通颗粒通过增加小肠推进、提高血清和组织胃动素分泌促进胃肠动力而发挥治疗功能性消化不良的作用；达立通颗粒能显著增加大鼠的胃电慢波频率，对大鼠胃电活动的影响与莫沙必利相似。提示达立通颗粒是通过增加胃动素释放和促进胃电活动促进胃排空和胃肠运动，从而达到治疗功能性消化不良的目的。

 

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(收稿日期：2018-03-22)